anogen：多重人細胞因子ELISA試劑盒(Th1/Th2/Th17) 貨號：EM10003

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多重人類細胞因子ELISA試劑盒(Th1/Th2/Th17細胞因子)，96孔

用于同時定量測定細胞培養(yǎng)上清液和其他生物樣品中的T輔助細胞分化細胞因子，包括干擾素-γ、白細胞介素-2、白細胞介素-4、白細胞介素-10、白細胞介素-13、白細胞介素-17、白細胞介素-22和腫瘤壞死因子-α

這種用于Th1/Th2/Th17細胞因子的多重ELISA試劑盒被設(shè)計用于半定量和同時測定與T輔助細胞分化相關(guān)的細胞因子。該試劑盒同時測定細胞培養(yǎng)上清液和其他生物樣品中的干擾素-γ(IFN-γ)、白細胞介素-2(IL-2)、白細胞介素-4(IL-4)、白細胞介素-10(IL-10)、白細胞介素-13(IL-13)、白細胞介素-17A(IL-17A)、白細胞介素-22(IL-22)和腫瘤壞死因子-α (TNF-α)。Th1/Th2/Th17細胞因子多重ELISA試劑盒與其他抗原定量細胞因子ELISA試劑盒結(jié)合，有望用于研究各種疾病模型中細胞因子表達、T輔助細胞分化之間的關(guān)系。   該試劑盒僅供實驗室研究使用，不應(yīng)用于任何診斷或治療程序。 

介紹 

T輔助細胞(Th細胞)是一組多樣化的CD4+ T細胞，通過細胞因子分泌和細胞間接觸(表面分子表達)在免疫應(yīng)答中發(fā)揮重要作用。Th細胞的重要性表現(xiàn)在HIV患者的獲得性免疫缺陷，其CD4+ T細胞被HIV病毒選擇性感染和破壞。Th細胞的功能是多方面的，包括刺激CD8+細胞毒性細胞，促進B細胞增殖，調(diào)節(jié)抗體亞類轉(zhuǎn)換，激活巨噬細胞和先天免疫系統(tǒng)中的其他細胞。 

T輔助細胞來源于幼稚CD4+ T細胞，其在骨髓中產(chǎn)生，并在與T細胞受體上的互補決定區(qū)相匹配的同源抗原接觸時，在外周淋巴器官和血液中分化為效應(yīng)Th細胞。在20世紀80年代中期，Th細胞根據(jù)其細胞因子分泌模式及其在細胞免疫和體液免疫中的作用被分為輔助性T細胞1(Th1)和輔助性T細胞2(Th2)。Th1細胞分泌IFN-γ作為其標志性細胞因子，也是IL-2的主要產(chǎn)生者。Th2細胞不能產(chǎn)生IFN-γ，但產(chǎn)生IL-4、IL-5和IL-13作為其標志性細胞因子。Th1細胞是宿主防御細胞內(nèi)細菌和病毒所必需的，而Th2細胞是針對細胞外寄生蟲的體液反應(yīng)所必需的。細胞因子在T輔助細胞譜系的發(fā)育和維持中起重要作用。在IL-12存在的情況下，幼稚的CD4+細胞傾向于分化為Th1，而IL-4刺激Th2的發(fā)展。有趣的是，一個Th亞群產(chǎn)生的細胞因子傾向于抑制其他Th亞群的發(fā)展。例如，Th2分泌的IL-10可以通過抑制Th1和刺激Th2分化來抵消IL-12的作用。 

在2005年，Harrington等人描述了分泌IL-17的CD4+ T細胞的新亞群作為輔助性T細胞17 (Th17 ),其參與自身免疫和清除細胞外細菌和真菌。據(jù)觀察，在缺乏IFN-r和IL-4的情況下，IL-23可以從幼稚的CD4+ T細胞誘導(dǎo)Th17細胞。最近，提出了T濾泡輔助細胞(Tfh)、調(diào)節(jié)性T細胞(Treg)、T輔助細胞9(Th9)和T輔助細胞22(Th12)。 

IL-2是驅(qū)動適應(yīng)性免疫的關(guān)鍵細胞因子之一。在T細胞受體通過與抗原呈遞細胞在MHC上呈遞的抗原結(jié)合而被激活后，由幼稚CD4+細胞立即分泌。IL-2刺激Th1分化、克隆擴增并作為自分泌刺激其自身產(chǎn)生。它還促進抗原特異性記憶T細胞的存活，并刺激調(diào)節(jié)性T細胞的成熟。細胞因子也影響B(tài)細胞、CD8+ T細胞、γδT細胞、NK細胞和LAK細胞的活性。

 IL-10由多種細胞類型表達，并在炎癥和免疫反應(yīng)中起重要作用。它下調(diào)Th1細胞因子的表達。IL-10還抑制單核細胞和中性粒細胞產(chǎn)生促炎細胞因子，下調(diào)單核細胞和樹突細胞上活化和共刺激分子的表達，并刺激B細胞和肥大細胞的生長。

由Th1，CD8產(chǎn)生+T細胞和自然殺傷(NK)細胞，已知IFN-g刺激幼稚CD4+ T細胞分化為Th1細胞。它既是病毒復(fù)制的抑制劑，也是許多免疫功能的調(diào)節(jié)劑。據(jù)報道，IFN-g誘導(dǎo)其自身的表達。IFN-g具有抗病毒、抗原蟲和免疫調(diào)節(jié)活性。IFN-g的免疫調(diào)節(jié)作用是廣泛而多樣的。在單核細胞/巨噬細胞中，IFN-g增加1類MHC抗原的表達；增加IL-1、血小板活化因子、H2O2和蝶呤，保護單核細胞免受LAK細胞介導(dǎo)的裂解；并下調(diào)IL-8 mRNA的表達。IFN-g選擇性增強IgG2aLPS刺激的B細胞活化分泌。 IFN-g已被證明能上調(diào)內(nèi)皮細胞上ICAM-1的表達，但不能上調(diào)E-選擇素或VCAM-1的表達。據(jù)報道，IFN-g還與胚胎間隔神經(jīng)元膽堿能表型的形成有關(guān)。

 IL-4最初被定性為B細胞刺激因子(BSF-1 ),因為它在Th2細胞分化、B細胞擴增和分化為漿細胞中起關(guān)鍵作用。后來發(fā)現(xiàn)IL-4是一種多效性細胞因子，對不同類型的細胞具有多種免疫反應(yīng)調(diào)節(jié)功能。IL-4誘導(dǎo)抗體類別轉(zhuǎn)換為IgE，上調(diào)II類產(chǎn)生，并在氣道過敏中起作用。IL-4刺激針對寄生蟲的保護性免疫。還報道了IL-4與轉(zhuǎn)移有關(guān)。IL- 4是由幼稚的CD4產(chǎn)生的+t細胞，Th2細胞，胎兒胸腺細胞，CD8+t細胞、肥大細胞和嗜堿性粒細胞。IL- 4與IL-13具有大約25%的氨基酸序列同源性，IL-13與IL-4具有許多相同的生物學(xué)功能。由四個外顯子和三個內(nèi)含子組成的人IL-4基因已經(jīng)被定位在一條染色體上，該染色體含有串聯(lián)排列的IL-3、IL-5、IL-9、IL-13和GM-CSF基因。 

IL-13主要由活化的輔助性T細胞分泌。除了IL-13Rα1和IL-13Rα2之外，IL-13還與IL-4Rα結(jié)合。IL-13的功能與IL-4部分重疊。IL-4和IL-13都通過受體激活與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)子和轉(zhuǎn)錄激活子6 (STAT6)連接。IL-13可以誘導(dǎo)B細胞增殖和IgE分類轉(zhuǎn)換。然而，與IL-4相比，IL-13在這方面的能力較弱。與IL-4不同，IL-13在造血細胞轉(zhuǎn)移中不發(fā)揮重要作用，如T輔助細胞向T輔助細胞2的分化。IL-13還與過敏性氣道疾病的許多特征相關(guān)，包括粘液分泌過多、杯狀化生、趨化因子誘導(dǎo)和效應(yīng)細胞募集。所有這些都會導(dǎo)致氣道阻塞。已發(fā)現(xiàn)IL-13基因多態(tài)性與嗜酸性粒細胞計數(shù)、血清總IgE和哮喘高風(fēng)險有關(guān)。據(jù)報道，IL-I3信號傳導(dǎo)在誘導(dǎo)寄生器官中非免疫細胞的生理變化中是重要的。

 IL-17A是新發(fā)現(xiàn)的促炎細胞因子家族的原型，該家族由IL-17A、IL-17B、IL-17C、IL-17D、IL-17E (IL-25)和IL-17F組成。所有的IL-17都具有相似的結(jié)構(gòu)，具有四個高度保守的半胱氨酸殘基和相同的三維結(jié)構(gòu)，這使該家族區(qū)別于其他細胞因子。IL-17由一組稱為Th17細胞的CD4+ T輔助細胞產(chǎn)生。除了先前發(fā)現(xiàn)的Th1和Th2細胞，Th17細胞存在于第三組輔助性T細胞中。IL-23，一種生長和穩(wěn)定因子，是第一個被發(fā)現(xiàn)參與Th 17細胞發(fā)育的細胞因子。后來，其他細胞因子，包括TGF-β，白細胞介素-6和白細胞介素-21，也被發(fā)現(xiàn)有助于這一過程。該過程中涉及的轉(zhuǎn)錄因子被鑒定為STAT3、RORgt和RORa。像IFN-g一樣，IL-17是延遲型反應(yīng)的有效介質(zhì)。IL-17誘導(dǎo)許多其他促炎細胞因子和趨化因子的分泌，如IL-6、IL-8、GM-CSF、G-CSF、TGF-β、TNF-α、GRO-α、MCP-1，并刺激NF-kappaB、絲裂原活化蛋白激酶和許多細胞類型的前列腺素的表達。通過刺激細胞因子的產(chǎn)生和募集單核細胞嗜中性粒細胞到炎癥部位，細胞因子在對組織損傷和侵襲的反應(yīng)中發(fā)揮其作用。 IL-22由樹突狀細胞、T細胞和自然殺傷細胞在細菌感染、自身免疫和組織炎癥過程中產(chǎn)生。

IL-22通過其專門在先天免疫細胞上表達的受體作用于這些細胞。在CD4+ T輔助細胞中，已發(fā)現(xiàn)IL-22表達與Th17和Th1相關(guān)。最近，通過共表達趨化因子受體CCR6和皮膚歸巢受體CCR4和CCR10，表征了表達IL-22的T輔助細胞亞群(Th22 ),其與其他T細胞不同。銀屑病皮膚炎癥、特應(yīng)性皮炎和炎癥性腸病中IL-22表達升高。在皮膚T細胞淋巴瘤中，IL-22主導(dǎo)腫瘤微環(huán)境，并且觀察到STAT3磷酸化。還發(fā)現(xiàn)IL-22在小鼠潰瘍性結(jié)腸炎模型中促進小鼠肝細胞存活并改善腸道炎癥。發(fā)現(xiàn)IL-22的天然拮抗劑IL-22結(jié)合蛋白下調(diào)IL-22的功能。 

腫瘤壞死因子α(TNF-α)，也稱為惡病質(zhì)素，最初因其引起小鼠腫瘤出血性壞死的顯著能力而命名。TNF-α的主要來源被認為是單核細胞/巨噬細胞，但已知各種細胞類型表達這種細胞因子。TNF-α在細胞因子如IL-1、1L-2、GM-CSF、TNF-α本身和細菌脂多糖的刺激下產(chǎn)生。Th1細胞分泌IFN-g、IL-2、IL-10和TNF-α/β。各種病理狀況與TNF-a的高水平產(chǎn)生有關(guān)，包括膿毒性休克綜合征、惡病質(zhì)、自身免疫性疾病、肝炎、白血病、心肌缺血、多發(fā)性硬化、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和腦膜炎球菌敗血癥。TNF-a是一種多效性細胞因子，可通過TNF-a毒性(組織損傷、分解代謝疾病和介導(dǎo)膿毒性休克)誘發(fā)疾病，并改善宿主防御機制(刺激炎癥和增加免疫細胞功能)。由于TNF-α在免疫反應(yīng)中具有如此復(fù)雜和重要的功能，研究TNF-α有助于理解其在T細胞分化中的作用。

 這種ELISA測定是一種3.5小時的固相免疫測定，可容易地應(yīng)用于測量細胞培養(yǎng)上清液和其它生物液體中與T輔助細胞分化相關(guān)的八種細胞因子的水平。它與其他蛋白質(zhì)無交叉反應(yīng)。

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