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MagVigen™ – Plasma DNA Capture

簡(jiǎn)要描述:MagVigen™ 血漿 DNA 捕獲試劑盒 (K61003) 能夠從血漿和血清中捕獲小的循環(huán)游離 DNA (>30bp)。MagVigen™ – Plasma DNA Capture

  • 產(chǎn)品型號(hào):K61003
  • 廠商性質(zhì):代理商
  • 更新時(shí)間:2023-12-18
  • 訪  問  量:855

詳細(xì)介紹

品牌其他品牌供貨周期一個(gè)月
應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥

MagVigen™ – Plasma DNA Capture

產(chǎn)品內(nèi)容

  • MagVigen™ 血漿 DNA 捕獲納米顆粒

  • 裂解緩沖液

  • 蛋白酶K

  • 蛋白酶 K 緩沖液

  • 洗滌緩沖液 1 庫存

  • 洗脫緩沖液

所需材料

  • 異丙醇

  • 乙醇

  • 十二烷基硫酸鈉,20%

  • 磁性架(NVIGEN Cat# A20006)

MagVigen™ 血漿 DNA 捕獲試劑盒 (K61003) 能夠從血漿和血清中捕獲小的循環(huán)游離 DNA (>30bp)。

Protocols

  1. 準(zhǔn)備血漿樣品:如果使用冷凍血漿,請(qǐng)?jiān)谑覝叵陆鈨?。將血漿以 12000x g 離心 5 分鐘,以去除任何血液和細(xì)胞碎片。


  2. 制備裂解緩沖液:如果有固體,則在 60°C 下加熱幾分鐘以制成澄清溶液。


  3. 制備蛋白酶溶液:將蛋白酶 K 緩沖液添加到蛋白酶 K 粉末瓶中。渦旋混合均勻。儲(chǔ)存于-20°C。


  4. 制備洗滌緩沖液 1:根據(jù)表 1 計(jì)算所需量。向每 550 ul 洗滌緩沖液 1 原液中添加 450 ul 異丙醇。每次都新鮮制作緩沖液。


  5. 檢查表1的總體積來決定使用的離心管類型(1.5ml、2ml、5ml、15ml或50ml)。


  6. 將蛋白酶 K 溶液添加到樣品管底部,將血漿添加到管中。渦旋 5 秒以充分混合,短暫離心。


  7. 將 20% SDS 添加到管中。渦旋 5 秒以充分混合,短暫離心。


  8. 將裂解緩沖液添加到管中。渦旋 1 分鐘以充分混合。短暫地旋轉(zhuǎn)下來。 60°C 孵育 30 分鐘。


  9. 添加 MagVigen™ 血漿 DNA 捕獲納米顆粒。輕輕搖動(dòng)小瓶使其分散。然后加入異丙醇,渦旋混勻,短暫離心,繼續(xù)渦旋 45 分鐘。


  10. 將反應(yīng)管放在磁力架上沉淀珠子,直至溶液澄清(10-20 分鐘,具體取決于磁鐵的強(qiáng)度和樣品體積)。


  11. 慢慢除去上清液。小心不要帶走任何珠子,盡可能多地除去溶液。將磁力架敲擊固體表面,使殘留溶液沉降到管底,除去所有上清液。


  12. 將管從磁鐵上取下,添加洗滌緩沖液 1。通過移液或渦旋混合。如果從較大的 15 或 50 ml 試管開始,請(qǐng)將溶液轉(zhuǎn)移到 1.5 或 2 ml 試管中。短暫地旋轉(zhuǎn)下來。將珠子放在磁力架上沉淀(約 10 分鐘),除去上清液。將磁力架敲擊表面。除去所有上清液。


  13. 使用 75% 乙醇清洗珠粒。不需要全分散珠粒。管子可以通過磁力架保持在適當(dāng)?shù)奈恢?。稍微向前和向后傾斜裝有樣品管的磁力架。然后短暫旋轉(zhuǎn),使蓋子中沒有溶液殘留。將珠子放在磁力架上(約 3 分鐘)并除去所有上清液。在固體表面上敲擊磁力架,使上清液殘留物沉降到管底部。除去所有上清液。


  14. 使用 75% 乙醇再次清洗珠粒。將珠子沉淀(約 2-3 分鐘)并除去所有上清液。


  15. 將管子放在磁力架上,風(fēng)干沉淀以蒸發(fā)所有乙醇。這需要 2-3 分鐘。


  16. 將所需量的洗脫緩沖液添加到珠子中,上下移液直至所有沉淀物全重新分散。將珠子分散在洗脫緩沖液中 3 分鐘。


  17. 短暫地旋轉(zhuǎn)下來。然后將管子放在磁力架上 2-3 分鐘。


  18. 收集上清液,不要干擾磁珠沉淀。上清液含有提取的DNA。吸取 DNA 溶液進(jìn)行下游實(shí)驗(yàn)時(shí),將管子放在磁鐵旁邊。提取的 cfDNA 溶液如果不立即使用,可保存在 -20°C。

MagVigen™ – Plasma DNA Capture

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